詳解超聲波提取罐在蛋白提取生產(chǎn)中的應(yīng)用 超聲波提取罐我們應(yīng)該都不陌生，它是一種提取質(zhì)量很高的設(shè)備，適合各種植物、動物等物質(zhì)的提取，被廣泛應(yīng)用于很多不同的領(lǐng)界，那么大家對于該設(shè)備在蛋白提取方面的事情了解嗎？下面就為大家介紹該提取設(shè)備在蛋白提取生產(chǎn)中的應(yīng)用。
蛋白質(zhì)的制備是一項(xiàng)十分細(xì)致的工作。涉及物理學(xué)、化學(xué)和生物學(xué)的知識很廣。近年來雖有了不少改進(jìn)，但其主要原理仍不外乎兩個(gè)方面：
一是利用混合物中幾個(gè)組分分配率的差別，把它們分配于可用機(jī)械方法分離的兩個(gè)或幾個(gè)物相中，如鹽析、有機(jī)溶劑提取、層析和結(jié)晶等；
二是將混合物置于單一物相中，通過物理力場的作用使各組分分配于不同區(qū)域而達(dá)到分離的目的，如電泳、超離心、超濾等。由于蛋白質(zhì)不能溶化，也不能蒸發(fā)，所能分配的物相只限于固相和液相，并在這兩相間互相交替進(jìn)行分離純化。制備方法可按照分子大小、形狀、帶電性質(zhì)及溶解度等主要因素進(jìn)行分類。按分子大小和形態(tài)分為差速離心、超濾、分子篩及透析等方法；按溶解度分為鹽析、溶劑抽提、分配層析、逆流分配及結(jié)晶等方法；按電荷差異分為電泳、電滲析、等電點(diǎn)沉淀、離子交換層析及吸附層析等；按生物功能專一性有親合層析法等。
由于不同生物大分子結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)不同，分離方法也不一樣。即同一類生物大分子由于選用材料不同，使用方法差別也很大。因此很難有一個(gè)統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)的方法對任何蛋白質(zhì)均可循用。因此實(shí)驗(yàn)前應(yīng)進(jìn)行充分調(diào)查研究，查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料，對欲分離提純物質(zhì)的物理、化學(xué)及生物學(xué)性質(zhì)先有一定了解，然后再著手進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作。對于一個(gè)未知結(jié)構(gòu)及性質(zhì)的試樣進(jìn)行創(chuàng)造性的分離提純時(shí)，更需要經(jīng)過各種方法比較和摸索，才能找到一些工作規(guī)律和獲得預(yù)期結(jié)果。其次在分離提純工作前，常須建立相應(yīng)的分析鑒定方法，以正確指導(dǎo)整個(gè)分離純化工作的順利進(jìn)行。高度提純某一生物大分子，一般要經(jīng)過多種方法、步驟及不斷變換各種外界條件才能達(dá)到目的。因此，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程方法的優(yōu)劣，選擇條件效果的好壞，均須通過分析鑒定來判明。
另一方面，蛋白質(zhì)常以與其他生物體物質(zhì)結(jié)合形式存在，因此也易與這些物質(zhì)結(jié)合，這給分離精制帶來了困難。如極微量的金屬和糖對巨大蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性起決定作用，若被除去則不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)結(jié)晶化的難度也隨之增加。如高峰淀粉酶A的Ca2+，胰島素Zn2+等。此外，高分子蛋白質(zhì)具有一定的立體構(gòu)象，相當(dāng)不穩(wěn)定，如前所述極易變性、變構(gòu)，因此限制了分離精制的方法。通常是根據(jù)具體對象聯(lián)用各種方法。為得到天然狀態(tài)的蛋白質(zhì)，盡量采用溫和的手段，如中性、低溫、避免起泡等，并還要注意防腐。
注意共存成分的影響。如蝮蛇粗毒的蛋白質(zhì)水解酶活性很高，在分離純化中需引起重視。純化蝮蛇神經(jīng)毒素時(shí)，當(dāng)室溫超過20℃時(shí)，幾乎得不到神經(jīng)毒素。蝮蛇毒中的蛋白水解酶能被0.1mol/LEDTA*抑制，因此在進(jìn)行柱層析前先將粗毒素0.1mol/LEDTA溶液處理，即使在室溫高于20℃，仍能很好的得到神經(jīng)毒素。
整個(gè)制備過程一般可分為5個(gè)階段：
1、材料的選擇和預(yù)處理，
2、細(xì)胞的破碎（有時(shí)需進(jìn)行細(xì)胞器的分離），
3、提取，
4、純化（包括鹽析，有機(jī)溶劑沉淀，有機(jī)溶劑提取、吸附、層析、超離心及結(jié)晶等），
5、濃縮、干燥及保存。以上5個(gè)階段不是要求每個(gè)方案都完整地具備，也不是每一階段截然分開。（具體可查看天宇超聲《中藥提取濃縮設(shè)備提取罐幾個(gè)提取方法》的相介紹）
不論是哪一階段使用哪一種方法，均必須在操作中保存生物大分子結(jié)構(gòu)的完整性。保存活性防止變性及降解現(xiàn)象的發(fā)生。因空間結(jié)構(gòu)主要依靠氫鍵、鹽鍵和范德華力的存在，遇酸、遇堿、高溫、劇烈的機(jī)械作用及強(qiáng)烈的輻射等均可導(dǎo)致活性喪失。因此選擇的條件應(yīng)為十分溫和。同時(shí)應(yīng)注意防止系統(tǒng)中重金屬離子、細(xì)胞自身酶系及其他有毒物質(zhì)的污染。
以上就是超聲波提取罐在蛋白提取生產(chǎn)中的應(yīng)用，希望能夠帶給大家一定的幫助，謝謝大家的觀看。
